KAPA KK2601 KK2602 HiFi Hot Start高保真热启动酶

KAPA KK2601 KK2602 HiFi Hot Start高保真热启动酶

上海金畔生物科技有限公司所提供的kapa KK2601/KK2602 KAPA HiFi高保真DNA聚合酶预混液,PCR /NGS等产品质量可靠、规格齐全
kapa KK2601/KK2602 品牌:kapa 货号: KK2601/KK2602

KAPA高保真热启动酶(KAPA HiFi™ Hot Start)是二代基因工程酶,保真性强,活力超高。基因工程改造后的KAPA高保真热启动酶,可以提高扩增产物的产量、酶的灵敏度、扩增速度、目标片段长度,扩增复杂模板的能力。

一般的高保真酶扩增1kb碱基大约需要1-2分钟,而KAPA高保真热启动酶只需要30秒,可以节省75%的实验时间。KAPA高保真热启动酶具有很强的3’-5’外切酶,确保扩增准确性。KAPA高保真热启动酶,含有2种buffer,分别用于常规模板扩增和高难度模板扩增。

具有以下特点:

1.超级保真;

2.可以扩增各种复杂模板;

3.扩增长度长,扩增基因组可超过15kb;

4.扩增速度快,节省75%以上的时间。

应用范围:

1.定点突变

2.测序

3.蛋白表达。

一、超级保真性
图1.KAPA高保真酶扩增的出错率是野生型Taq酶的1/30,是Taq blends的1/10,是野生型Pfu的1/3。
二、扩增产量高、灵敏性高

     Figure 2. Amplification of hgDNA targets up to 11 kb. Each target was amplified from a descending range of template hgDNA concentrations (50 ng to 0.5 ng per reaction). Reactions (25 μl each) were performed using standard 3-step cycling profiles (35 cycles): 20 sec denaturation, 15 sec annealing, and 30 sec/kb extension time. Total reaction time for the 11 kb amplicon was 3h 50mins. 12.5 μl of each reaction was loaded on the gel.
三、超级灵敏、高度保真

Figure3.  2 kb lambda phage target amplified from a 10 fold dilution series starting from 10 ng down to 10 fg using KAPAHiFi™ HotStart DNA Polymerase with Fidelity Buffer, fusion technology polymerase, and polymerase blend systems. All reactions (25 μl each) were performed using manufacturers’ protocols and buffers, with standard 3-step cycling profiles (35 cycles). 12.5 μl of each reaction was loaded on the gel.

四、困难复杂模板的扩增

Figure 4. Amplification of AT- and GC-rich, single-copy human genomic targets. Seven single-copy gene fragments representing a range of GC content were used to compare the robustness of KAPAHiFi™ HotStart DNA Polymerase against a panel of competitor high fidelity DNA polymerases and polymerase blends. Amplicons range between 0.5 kb and 0.7 kb in length and ranged from 47% to 84% GC content. All reactions (25 μl each) contained 50 ng human genomic DNA as template and were performed using manufacturers’ protocols and buffers, with standard 3-step cycling profiles (35 cycles). 12.5 μl of each reaction was loaded on the gel.

五、产品信息

产品编号 产品名称 产品描述 产品规格
KK2101 HiFi High fidelity 100 units,200reactions
KK2102 HiFi High fidelity 250 units,500reactions
KK2501 HiFi Hot Start High fidelity 100 units,200reactions
KK2502 HiFi Hot Start High fidelity 250 units,500reactions
KK2601 HiFi Hot Start Readymix (100 x 25 ul rxn) 100 rxn
KK2602 HiFi Hot Start Readymix (500 x 25 ul rxn) 500 rxn

KAPA KK7101 Express Extract DNA快速提取试剂盒

KAPA KK7101 Express Extract DNA快速提取试剂盒

简单介绍:KAPA Express Extract DNA快速提取及扩增 ,KAPA代理,KAPA KK7101,KAPA

KAPA 快速提取试剂盒

KAPA快速提取试剂盒适合从多种样品中直接提取DNA,仅需10分钟左右。目前市场上的提取试剂盒主要依靠蛋白酶K来消化,但KAPA快速DNA提取试剂盒是一步法提取,且不需要有毒有害化学物质,亦无需繁琐的操作。

一、操作流程:

样品的裂解可以在PCR仪上操作完成,样品处理完成后离心,DNA即存在上清液中。提取的DNA可以直接用于PCR扩增。从每个样品中提取的DNA量,可以满足100次25μl的PCR反应需要,如果长期保存,需要用TE Buffer稀释后于-20℃保存。

二、优势:

1.提取速度快,操作步骤简单,整个过程大约10-20分钟,无需任何有毒有害化学物质和多余的操作步骤;

2.节省实验周期,降低样品丢失或被污染的风险;

  1. 可在PCR仪96孔板上批量处理样品,极大提高样品处理速度;

25ul的反应体系中加入1ul的DNA提取物即可,一次提取可满足100次扩增;

  1. PCR反应前无需对DNA进行定量;

5.提取产物用TE buffer稀释10倍后于-20℃保存。

三、应用范围:

1.石蜡包埋组织(FFPE);

2.人的血液(新鲜或EDTA抗凝血、血卡、带血滤纸);

3.血卡、带血滤纸

4.口腔拭子;

5.人的毛囊;

6.小鼠耳片、尾巴尖;

7.鱼鳍或鱼肉。

表1. KAPA快速提取实验操作步骤

步骤 内容
反应体系 将下面的试剂加入反应管中
10x KAPA quick Extract Buffer 10ul
1U/ul Quick Extract Enzyme 2.0ul
PCR grade water Up to 100ul
样品 见下表
裂解 75℃,5-10分钟

细胞被裂解,核酸酶和其他蛋白被降解,DNA被释放出来

热失活 95℃ 5分钟,失活试剂盒中的酶
回收与保存 震荡2-3秒钟,高速离心1分钟,将含有DNA的上清转移到一个新的管中。

取1ul进行PCR反应;

保存:用TE buffer稀释后-20℃长期保存。

表2.样品种类与推荐的酶量、裂解时间的对应表

样品类型 样品尺寸/体积 裂解温度与时间
石蜡组织 1mm3或2mm210um厚度切片 75℃,10分钟
人血(鲜血或EDTA抗凝血) 2ul 75℃,5分钟
血卡 1-2 mm2 75℃,10分钟
头发毛囊 至少3根 75℃,5分钟
口腔拭子 1.5ml的管中加入1个口腔拭子,加入300ul 0.5×KAPA Quick Extract Buffer 75℃,10分钟
小鼠尾巴 ~2mm3 75℃,10分钟
小鼠耳片 2mm2 75℃,10分钟
鱼鳍片 2mm2 60℃,10分钟
鱼肉 ~2mm3 60℃,10分钟

多功能性:可以快速提取不同类型的样品
KAPA Express Extract适用于不同类型组织的DNA提取,包括buccal swabs、毛囊、FFPE组织、骨髓、血液和加工食品等,而且比传统的DNA提取更加简单方便,并且提取效率高。

KAPA KK7101 Express Extract DNA快速提取试剂盒

产品规格

产品 货号 规格
KAPA Express Extract Kk7100 50次
KAPA Express Extract Kk7101 100次
KAPA Express Extract Kk7102 250次
KAPA Express Extract+PCR ReadyMix Kk7151 100次
KAPA Express Extract+PCR ReadyMix Kk7152 500次

图1:用KAPA Express Extract在哺乳动物和鱼中提取DNA,取2μL直接进行PCR,扩增650bp的细胞色素氧化酶Ⅰ基因,用于分类,下图为PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测结果及产物测序结果。
FFPE组织中DNA提取速度快PCR成功率高

图2:KAPA Express Extract从两个不同的FFPE样品中提取DNA,样品1保存6个月以上,样品2保存1年以上,DNA提取后直接进行PCR扩增,EGFR基因的5个不同的片段(293bp-1kb),增结果与使用相同反应条件和循环数的使用1ng纯化的DNA进行扩增的结果进行比较。
不同类型的血液样品的DNA提取

KAPA Biosystems HiFi高保真酶KAPA KK2601说明书

KAPA Biosystems HiFi高保真酶KAPA KK2601说明书

KAPA Biosystems代理

KAPA Biosystems官网:www.kapabiosystems.com

KAPA HiFi PCR Kits 高保真PCR

成分;

KAPA HiFi Standard or HotStart DNA Polymerase (1 U/μL)

5X KAPA HiFi Fidelity Buffer

5X KAPA HiFi GC Buffer

MgCl2 (25 mM)

dNTP Mix (10 mM each)

KAPA HiFi HotStart也可用于KAPA HiFi HotStart ReadyMix(2X)

其中包含DNA聚合酶,反应缓冲液,dNTP和MgCl 2(终浓度为2.5 mM)。

试剂盒包括

KAPA HiFi或KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶(1 U /μL),

保真缓冲液(5X)

GC缓冲液(5X)

高质量dNTP(各10 mM)和MgCl2(25 mM)

两种缓冲液均含有MgCl 2,终浓度为2mM。

货号           Roche Cat. No          Description                                       Kit Size

KK2601     0795 892 7001      HotStart ReadyMix,100 x25μL            1.25ml

KAPA HiFi PCR Kits 高保真PCR

KAPA HiFi PCR试剂盒

针对困难模板的保真度,稳健性和低偏差放大而演变。

KAPA HiFi DNA聚合酶是一种新型的单酶系统,与其他高保真聚合酶和聚合酶混合物相比,具有业界好的性能。KAPA HiFi经过精心设计,可以增加对DNA的亲和力,而无需辅助蛋白结构域。KAPA HiFi固有的高持续合成能力显着提高产量,灵敏度,速度,目标长度以及扩增困难模板(例如富含AT和GC)的能力。KAPA HiFi PCR试剂盒的错误率比野生型TaqDNA聚合酶低100倍。

仅供研究使用。不用于诊断过程。

产品亮点

1.实现高保真度

增强的持续性,强大的校对活动和优化的缓冲系统可带来的准确性

KAPA HiFi的错误率比Taq低100?倍,比聚合酶混合物低40倍,比Pfu Ultra低3倍,比Phusion低2倍

2.提高GC和AT丰富模板的性能

在目标GC和GC含量高达84%的情况下实现更高的成功率

放大富含AT的模板时产量更高

3.以更高的灵敏度放大更长的目标?

长和复杂基因组模板的高保真PCR

提高灵敏度

高速可以显着缩短长程PCR的反应时间

产品应用:

高保真PCR

扩增DNA用于克隆和蛋白质表达或基因组表征

定点突变

新一代测序文库扩增

在-20°C下储存试剂盒18个月。

Spec                                    Description

Starting Material                DNA, cDNA, plasmid DNA

Input Amount                 <25 ng for gDNA or <1 ng of plasmid DNA

KAPA Biosystems HiFi高保真酶KAPA KK2601说明书

Product Line KAPA Code Product Chinese Name Product Description Spec Rxn
HiFi & Lib Amp KK2101 KK2101 KAPA HiFi高保真酶+dNTPs (100反应) KAPA HiFi+dNTPs (100rxn) 100*50μL rxn/200*25μL rxn 100
HiFi & Lib Amp KK2102 KK2102 KAPA HiFi高保真酶+dNTPs (250反应) KAPA HiFi+dNTPs (250rxn) 250*50μL rxn/500*25μL rxn 250
HiFi & Lib Amp KK2501 KK2501 KAPA 热启动HiFi高保真酶+dNTPs (100反应) KAPA HiFi HotStart+dNTPs (100rxn) 100*50μL rxn/200*25μL rxn 100
HiFi & Lib Amp KK2502 KK2502 KAPA 热启动HiFi高保真酶+dNTPs (250反应) KAPA HiFi HotStart+dNTPs (250rxn) 250*50μL rxn/500*25μL rxn 250
HiFi & Lib Amp KK2601 KK2601 KAPA 热启动HiFi高保真酶预混液 (1.25mL) KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (1.25mL) 1.25mL/50*50μL rxn/100*25μL rxn 50
HiFi & Lib Amp KK2602 KK2602 KAPA 热启动HiFi高保真酶预混液 (6.25mL) KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (6.25mL) 6.25mL/250*50μL rxn/500*25μL rxn 250
HiFi & Lib Amp KK2631 KK2631 KAPA 热启动HiFi高保真酶预混液 (50mL) KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (50mL) 50mL/2000*50μL rxn/4000*25μL rxn 2000
HiFi & Lib Amp KK2625 KK2625 KAPA 热启动HiFi高保真酶预混液 (50mL) v2 KAPA HiFi HotStart ReadyMix Kit (50mL) v2 50mL/2000*50μL rxn/4000*25μL rxn 2000
HiFi & Lib Amp KK2801 KK2801 KAPA Uracil+热启动HiFi高保真酶预混液 (1.25mL) KAPA HiFi HotStart Uracil+ ReadyMix Kit (1.25mL) 1.25mL/50*50μL rxn/100*25μL rxn 50
HiFi & Lib Amp KK2802 KK2802 KAPA Uracil+热启动HiFi高保真酶预混液 (6.25mL) KAPA HiFi HotStart Uracil+ ReadyMix Kit (6.25mL) 6.25mL/250*50μL rxn/500*25μL rxn 250