KAPA 小鼠基因分型试剂盒 KK7302

KAPA HotStart小鼠基因分型试剂盒含KAPA 快速提取酶(一种新型热稳定蛋白酶)、缓冲体系(能够在短短15分钟内从小鼠组织提取出PCR就绪的DNA)和含染料的KAPA2G快速基因分型混合物(所含DNA聚合酶通过定向优化技术改造,具有高持续性,作用速度快)。KAPA 快速提取酶和KAPA2G快速基因分型混合物结合使用可在短至1小时内可靠地从小鼠组织中提取和扩增DNA片段,而传统方案则需要 ≥1天的时间。KAPA2G快速基因分型混合物(2X)是随时可用的主混合物,包含除引物和模板以外所有用于快速PCR的组分。
应用
KAPA 小鼠基因分型试剂盒用于小鼠尾部[1][2]、耳部[3]以及趾组织 DNA 的提取和扩增。此试剂盒也适用于从其他动物组织提取和扩增DNA,但可能需要优化操作方案。
生化/生理作用
用 KAPA2G 快速基因分型混合物(KAPA2G Fast Genotyping Mix)产生的DNA片段带3′-dA-尾,可克隆至 TA 克隆载体,或用于限制性内切酶消化、克隆和测序等常规下游分析及应用。与野生型Taq一样,KAPA2G Fast 含有5’→3’聚合酶和5’→3’核酸外切酶活性,但没有3’→5’核酸外切酶(校对)活性。 KAPA2G Fast的保真度与野生型Taq相似。错误率约为每插入1.7 x 105个核苷酸产生1个错误。
特点和优势
提高生产能力、周转时间和可靠性:
PCR-ready DNA 只需 15 分钟即可生成
最低限度的处理,从而降低样本丢失或污染的风险
有充足模板用于多种测定;易于缩放,以处理 96 孔格式的样本
快速可靠地扩增各种扩增子长度和 GC 含量各异的 DNA 片段

优于粗提取方法和商业试剂盒:
增加周转时间 增加特异性 降低成本

简要说明:
15 分钟内即可从小鼠尾部、耳朵或趾组织中提取 PCR就绪 DNA,
进行 PCR 前,将 DNA 提取液在 10 mM Tris-HCl (pH 8.0–8.5) 中稀释 10 倍,每25 μL反应用 1 μLDNA。
提取液在-20℃ 下可稳定储存 >6 个月。
KAPA2G 快速(热启动) 基因分型混合物包含用于快速 PCR 的工程化 KAPA2G 快速 DNA 聚合酶、缓冲液、MgCl2 (1.5 mM,1X) 和 dNTP (每种 0.2 mM,1X)。
KAPA2G 快速基因分型混合物中包含电泳上样染料,可将 PCR 产物直接上样至琼脂糖凝胶进行分析。
对于 <1 kb 的扩增子,采用 15 s的退火时间和15 s 的延长时间;对于更长的扩增子,采用 15-30 s/kb 的延长时间。
质量
KAPA 小鼠基因分型试剂盒中包含的所有组分均经过严格的质量控制检测,不含污染性的外切和内切核酸酶活性,符合关于DNA污染水平的严格要求。
制备说明
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下,以供短期使用(最长1个月)。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染,试剂盒在室温下放置短时间(最长3天)预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意,储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
其他说明
仅供研究使用。不用于诊断操作。