KAPA KK7101 Express Extract DNA快速提取试剂盒
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KAPA 快速提取试剂盒
KAPA快速提取试剂盒适合从多种样品中直接提取DNA，仅需10分钟左右。目前市场上的提取试剂盒主要依靠蛋白酶K来消化，但KAPA快速DNA提取试剂盒是一步法提取，且不需要有毒有害化学物质，亦无需繁琐的操作。
一、操作流程：
样品的裂解可以在PCR仪上操作完成，样品处理完成后离心，DNA即存在上清液中。提取的DNA可以直接用于PCR扩增。从每个样品中提取的DNA量，可以满足100次25μl的PCR反应需要，如果长期保存，需要用TE Buffer稀释后于-20℃保存。
二、优势：
1.提取速度快，操作步骤简单，整个过程大约10-20分钟，无需任何有毒有害化学物质和多余的操作步骤；
2.节省实验周期，降低样品丢失或被污染的风险；
- 可在PCR仪96孔板上批量处理样品，极大提高样品处理速度；
25ul的反应体系中加入1ul的DNA提取物即可，一次提取可满足100次扩增；
- PCR反应前无需对DNA进行定量；
5.提取产物用TE buffer稀释10倍后于-20℃保存。
三、应用范围：
1.石蜡包埋组织(FFPE)；
2.人的血液（新鲜或EDTA抗凝血、血卡、带血滤纸）；
3.血卡、带血滤纸
4.口腔拭子；
5.人的毛囊；
6.小鼠耳片、尾巴尖；
7.鱼鳍或鱼肉。
表1. KAPA快速提取实验操作步骤
| 步骤 | 内容 | |
| 反应体系 | 将下面的试剂加入反应管中 | |
| 10x KAPA quick Extract Buffer | 10ul | |
| 1U/ul Quick Extract Enzyme | 2.0ul | |
| PCR grade water | Up to 100ul | |
| 样品 | 见下表 | |
| 裂解 | 75℃，5-10分钟
细胞被裂解，核酸酶和其他蛋白被降解，DNA被释放出来 |
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| 热失活 | 95℃ 5分钟，失活试剂盒中的酶 | |
| 回收与保存 | 震荡2-3秒钟，高速离心1分钟，将含有DNA的上清转移到一个新的管中。
取1ul进行PCR反应； 保存：用TE buffer稀释后-20℃长期保存。 |
|
表2.样品种类与推荐的酶量、裂解时间的对应表
| 样品类型 | 样品尺寸/体积 | 裂解温度与时间 |
| 石蜡组织 | 1mm3或2mm210um厚度切片 | 75℃，10分钟 |
| 人血（鲜血或EDTA抗凝血） | 2ul | 75℃，5分钟 |
| 血卡 | 1-2 mm2 | 75℃，10分钟 |
| 头发毛囊 | 至少3根 | 75℃，5分钟 |
| 口腔拭子 | 1.5ml的管中加入1个口腔拭子，加入300ul 0.5×KAPA Quick Extract Buffer | 75℃，10分钟 |
| 小鼠尾巴 | ~2mm3 | 75℃，10分钟 |
| 小鼠耳片 | 2mm2 | 75℃，10分钟 |
| 鱼鳍片 | 2mm2 | 60℃，10分钟 |
| 鱼肉 | ~2mm3 | 60℃，10分钟 |
多功能性：可以快速提取不同类型的样品
KAPA Express Extract适用于不同类型组织的DNA提取，包括buccal swabs、毛囊、FFPE组织、骨髓、血液和加工食品等，而且比传统的DNA提取更加简单方便，并且提取效率高。
KAPA KK7101 Express Extract DNA快速提取试剂盒
产品规格
| 产品 | 货号 | 规格 |
| KAPA Express Extract | Kk7100 | 50次 |
| KAPA Express Extract | Kk7101 | 100次 |
| KAPA Express Extract | Kk7102 | 250次 |
| KAPA Express Extract+PCR ReadyMix | Kk7151 | 100次 |
| KAPA Express Extract+PCR ReadyMix | Kk7152 | 500次 |
图1：用KAPA Express Extract在哺乳动物和鱼中提取DNA，取2μL直接进行PCR，扩增650bp的细胞色素氧化酶Ⅰ基因，用于分类，下图为PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳检测结果及产物测序结果。
FFPE组织中DNA提取速度快PCR成功率高
图2：KAPA Express Extract从两个不同的FFPE样品中提取DNA，样品1保存6个月以上，样品2保存1年以上，DNA提取后直接进行PCR扩增，EGFR基因的5个不同的片段（293bp-1kb），增结果与使用相同反应条件和循环数的使用1ng纯化的DNA进行扩增的结果进行比较。
不同类型的血液样品的DNA提取