KK5512/KK5510-KAPA2G快速热启动PCR试剂盒, with dNTPs & Mg-free buffers
KAPA2G快速DNA聚合酶是第二代(2G)酶,设计用于更高持续合成能力和速度,与野生型Taq聚合酶相比,其延伸速率更快。除了速度之外,KAPA2G快速在许多靶中的产量和灵敏度都优于竞争对手的酶。
KAPA2G快速DNA聚合酶试剂盒专为快速PCR设计而成,与用野生型Taq DNA聚合酶进行的常规PCR试验相比,其总反应时间短20-70%。这可以在不牺牲反应性能的情况下实现,并且不需要专门的PCR消耗品或热循环仪。
应用
KAPA2G Fast HotStart® PCR试剂盒已用于:
常规PCR[1][1]
Fast PCR[2]
基因分型
生化/生理作用
KAPA2G Fast DNA聚合酶产生的DNA片段可用于常规下游分析或应用,包括限制酶消化、克隆和测序。和野生型Taq一样,KAPA2G Fast 具有 5’→3’聚合酶和 5’→3’核酸外切酶活性,但是没有3’→5’核酸外切酶(校正)活性。KAPA2G Fast的精确性与野生型Taq相近;错配率约为每结合1.7 x 105个核甘酸错配1次。
特点和优势
将循环时间缩短至75%:
延伸时间低至每千碱基1秒
覆盖范围广泛,富含AT和GC的靶
高速、高性能:
复杂靶的单拷贝灵敏度
产量增加
临时速记:
KAPA2G快速热启动PCR试剂盒,含dNTP和无镁缓冲液,包含为快速PCR开发的工程化KAPA2G快速热启动DNA聚合酶。
Use 1 sec extension time for amplicons <1 kb and 15 sec/kb for longer amplicons, and save 20–70% of total reaction time.
不需要专门的仪器或PCR消耗品。
优化的缓冲体系提高了产量、特异性和灵敏度,有助于在各种引物长度、GC含量和熔化温度下进行有效的引物筛选。
每25 μL反应,使用0.5 U KAPA2G快速热启动DNA聚合酶;或对于更小体积,使用更少的聚合酶。
为了提高反应效率,不要超过25 μL反应体积。
该缓冲液可包含及不含氯化镁KAPA2G缓冲液A在1X条件下包含1.5 mM氯化镁,而KAPA2G缓冲液M不含镁。除氯化镁含量外,这两个缓冲液是相同的。
反应产物是3′-dA尾的,可以克隆到TA克隆载体中。
质量
Each batch of KAPA2G Fast DNA Polymerase is confirmed to contain <2% contaminating protein (Agilent Protein 230 Assay). KAPA2G Fast Ready Mix is subjected to stringent quality control tests, is free of contaminating exo- and endonuclease activity, and meets strict requirements with respect to DNA contamination levels.
制备说明
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下,以供短期使用(最长1个月)。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染,试剂盒在室温下放置短时间(最长3天)预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意,储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
其他说明
仅供研究使用。不不用于诊断操作。