KAPA2G快速热启动PCR试剂盒, Mg and Mg-free buffers

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KAPA2G FAST DNA聚合酶是专为提高产率和速度而设计的第二代（2G）酶，与野生型Taq 聚合酶相比，其延伸速率更快。除速度外，KAPA2G Fast在大量的靶标中比竞争对手的酶具有更高的产量和灵敏度。KAPA2G Fast HotStart®PCR试剂盒设计用于快速PCR，与使用野生型Taq DNA聚合酶进行的常规PCR分析相比，总反应时间能够缩短20–70％。这可以在不牺牲反应性能的情况下实现，并且不需要专门的PCR耗材或热循环仪。
应用
KAPA2G Fast HotStart PCR 试剂盒已被用于：
Fast PCR[1]
基因分型
染色质免疫沉淀 (ChIP) 序列库的定量[2]
常规聚合酶链式反应（PCR）[3]
生化/生理作用
KAPA2G Fast DNA聚合酶生成的DNA片段，具有与野生型 Taq DNA 聚合酶产生的DNA片段相同的特性。它可用于常规下游分析，如限制性内切酶消化、克隆和测序。与野生型Taq类似，KAPA2G Fast具有5′→3′ 聚合酶和5′→3′核酸外切酶活性。但是它没有3′→5′ 核酸外切酶（校正）活性。KAPA2G Fast的保真度和野生型Taq相当，其错误率为每结合1.7 x 105个核苷酸大约出现1次错误。
特点和优势
可最高降低75%的循环时间：
延伸时间低至每千碱基1秒
覆盖范围广泛，富含AT和GC的靶

高速、高性能：
复杂靶的单拷贝灵敏度
产量增加

临时速记：
KAPA2G Fast HotStart®PCR试剂盒含有经改造优化用于快速PCR的KAPA2G Fast HotStart DNA聚合酶。
对于<1 kb的扩增子使用1秒的颜色时间而对更长的扩增子使用15秒/kb，可节省20-70%的总反应时间。
不需要专门的仪器或PCR消耗品。
优化的缓冲系统可提高产量、特异性和灵敏度，有助于在各种引物长度、GC含量和熔解温度下进行有效的引物退火。
每25 μL或更低体积的反应使用0.5 U KAPA2G Fast HotStart DNA聚合酶。
为了实现高反应效率，不要超过956μL反应体积。
该缓冲液可提供含有或不含有MgCl2的版本。KAPA2G Buffer A含有1X的1.5 mM MgCl2，而KAPA2G Buffer M是不含Mg的。除了MgCl2 含量外，这两种缓冲液都是一样的。
反应产物是3′-dA尾的，可以克隆到TA克隆载体中。
质量
每批次KAPA2G FAST DNA聚合酶均已确认含有<2％的污染蛋白（Agilent Protein 230分析）。KAPA2G Fast ReadyMix™经过严格的质量控制测试，不具有污染外切核酸酶和内切核酸酶的活性，并且满足有关DNA污染水平的严格要求。
制备说明
始终确保产品在使用前已完全解冻和混匀。试剂可在4°C下短期储存（最长1个月）。长期储存需放回至-20°C。如果所有组分都经过仔细处理且没有受到污染，则试剂盒被（无意中）短暂的（最长3天）放置在室温也不会受到影响。不建议在室温和4°C下长期储存。请注意，储存在-20°C以上的试剂在使用过程中受污染后更容易发生降解，因此在此类温度下储存的风险由用户自行承担。
其他说明
仅供研究使用。不可用于诊断过程。