KAPA2G Fast DNA聚合酶是专为提高产率和速度而设计的第二代(2G)酶,与野生型Taq聚合酶相比,其提供了更快的延伸速率。除速度外,KAPA2G Fast在大量的靶标中比竞争对手的酶具有更高的产量和灵敏度。KAPA2G FAST DNA聚合酶试剂盒设计用于快速PCR,与使用野生型Taq DNA聚合酶进行的常规PCR分析相比,总反应时间能够缩短20–70%。这可以在不牺牲反应性能的情况下实现,并且不需要专门的PCR耗材或热循环仪。
应用
KAPA2G Fast PCR试剂盒适用于:
常规聚合酶链式反应(PCR)[1]
多重PCR
快速光PCR样品 [2]
Fast PCR
基因分型
生化/生理作用
用KAPA2G Fast DNA聚合酶产生的DNA片段与用野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段具有相同特性,可用于限制性内切酶消化、克隆和测序等常规下游分析及应用。和野生型Taq一样,KAPA2G Fast具有5’→3’聚合酶和5′→3′核酸外切酶活性,但是没有3’→5’核酸外切酶(校正)活性。KAPA2G快速聚合酶的保真度类似于Taq聚合酶;每1.7 x 105核苷酸的错配数约为1个。
特点和优势
可最高降低75%的循环时间:
延伸时间低至1秒每千碱基
对于AT-和GC-富集目标都具有广泛的覆盖
高速、高性能:
来自复杂靶标的单拷贝灵敏度
更高的产量
临时速记:
KAPA2G Fast PCR试剂盒包含为快速PCR开发的工程化KAPA2G Fast DNA聚合酶。
对于<1 kb的扩增子使用1秒的颜色时间而对更长的扩增子使用15秒/kb,可节省20-70%的总反应时间。
不需要专门的仪器或PCR消耗品。
优化的缓冲系统提供了更高的产量、特异性和灵敏度,有利于在广泛的引物长度、GC 含量和熔解温度范围内进行有效的引物退火。
每25 μL或更低体积的反应使用0.5 U KAPA2G Fast DNA聚合酶。
为了实现高反应效率,不要超过956μL反应体积。
含有1.5mM MgCl2的KAPA2G缓冲液A(1X)。
反应产物是3′-dA尾的,可以克隆到TA克隆载体中。
质量
每批次KAPA2G FAST DNA聚合酶均已确认含有 <2%的污染蛋白(Agilent Protein 230分析)。KAPA2G Fast ReadyMix经过严格的质量控制测试,不具有污染外切核酸酶和内切核酸酶的活性,并且满足有关DNA污染水平的严格要求。
制备说明
在每次使用前,应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时,可将试剂保存4℃条件下(最长1个月)。长期储存时,应将试剂放回-20℃环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染,则在室温下(无意地)短时间(最多3天)放置,预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4℃下长期保存。请注意,储存在高于-20℃的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此在此温度下储存的风险由用户自负。
其他说明
仅供研究使用。不用于诊断操作。
KAPA2G快速PCR试剂盒 KK5021